实验案例
欧洲国家杯赛程表 实验案例 高通量组织研磨仪对真菌细胞的破壁及DNA提取
2020/12/21 12:03:21
高通量组织研磨仪对真菌细胞的破壁及DNA提取
来源:上海净信

实验目的:对真菌细胞进行破壁,提取其DNA。

实验原理:

随着分子生物学技术的进展,PCR相关方法越来越多地被应用到真菌学研究中来,而真菌DNA的提取是包括分子诊断在内的所有实验的基础,简便快捷地提取真菌DNA,且获得的DNA完整、纯度高,对真菌分子生物学的研究有及其重要的意义。

真菌细胞壁以几丁质、葡萄糖为主构成细胞壁骨架,而基质则由多糖、甘露聚糖、糖蛋白、脂质等填充。丝状真菌坚韧厚壁的构成,需要较为繁琐的破壁手段,故真菌DNA的提取较细菌或其他组织细胞难度更大。为保证真菌PCR技术及其相关分子生物学技术的顺利开展,简便快捷地提取真菌DNA,且获得的DNA完整、纯度高,是必须解决的前提条件。

实验材料和器具:

样品:真菌类

仪器:高通量组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-48)

耗材:离心管,研磨珠(上海净信)

试剂:TE Buffer,DA Buffer,E Binding Buffer,Elution Buffer

实验步骤:

需了解具体步骤,请致电厂家

实验结果

图1 提取DNA的检测  M:100bp 标准参照物

图2 提取DNA的PCR检测结果  M:100bp 标准参照物